Kamis, 21 Mei 2015

ANIMAL PHYSIOLOGY PRACTICAL REPORT Counting of Erythrocytes and Leukocytes in Poikilotermik Animals and Homoiotermik Animals



Description: Description: UNEJ

ANIMAL PHYSIOLOGY
PRACTICAL REPORT
Counting of Erythrocytes and Leukocytes in Poikilotermik Animals and Homoiotermik Animals











By:
Zakyah
120210153086
A-International







BIOLOGY EDUCATION STUDY PROGRAM
SCIENCE DEPARTMENT EDUCATION
FACULTY OF TEACHER TRAINING AND EDUCATION
JEMBER UNIVERSITY
2014
      I.          Title
Counting of erythrocytes and leukocytes in poikilotermik animals and homoiotermik animals
   II.          Purpose
·        The purpose of this activity is to count erythrocytes and leukocytes in animals belonging poikilotermik
·        The purpose of this activity is to count erythrocytes and leukocytes in animals belonging homoiotermik
 III.          Basic Theory
Blood is the fluid matrix and is a specialized connective tissue that is formed from the free cells. Blood consists of a liquid called plasma components and the various elements that are carried in the plasma of blood cells. Blood cells consist of erythrocytes or red blood cells, the cells that carry oxygen, white blood cells or leukocytes are cells involved in immunity and defense of the body and platelets are cells that play a role in homeostasis (Frandson, 1992). Erythrocytes have a role as a transport medium. While leukocytes serves as a means of defense that has the property of penetrating body tissue without damaging the tissue (Pearce, 1979). Transport of oxygen in the blood depends on the iron components in the respiratory pigment hemoglobin normally. Haemoglobin is the part of red blood cells that binds oxygen. Blood is composed of cells and cell fragments found freely in the medium that is liquid called blood plasma. The cells of blood cell fragments are elements called elements so. These cells are large enough to be observed with an ordinary microscope. Blood plasma is the liquid portion of the blood that consists of 99% water and 8-9% protein (Kimball, 1988). Blood is very important for the organism, if the deficiency or excess of blood cells resulting in abnormal physiological processes of the organism causing a disease (Pearce, 1979).
Blood is composed of cells and cell fragments found freely in the medium that is liquid called blood plasma. The cells of blood cell fragments are elements called elements so. These cells are large enough to be observed with an ordinary microscope. Blood plasma is the liquid portion of the blood that consists of 99% water and 8-9% protein (Kimball, 1988). Blood is very important for the organism, if the deficiency or excess of blood cells resulting in abnormal physiological processes of the organism causing a disease (Pearce, 1979).
Erythrocytes
General mammalian erythrocytes biconcave disc-shaped, red because it contains hemoglobin. Erythrocytes formed in the red bone marrow and eritroblas derived from hemositoblas. In mammals mature erythrocytes core loss, mitochondria, ribosomes, and several enzymes. In humans is estimated in each ml of blood terjandung 4.5 million to 5 million erythrocytes. Human erythrocytes is able to live an average of only 120 days. Old erythrocyte plasma membrane becomes fragile when in contact with the walls of blood capillaries (Soewolo, 2000). Erythrocytes is a type of blood cell that was the most in the blood. Most vertebrates have nucleated erythrocytes except oval and mammals. Erythrocytes are elliptical in shape, flattened, nucleated containing pigment - a respiratory pigment yellow to red, which is called hemoglobin that carries oxygen to function (Frandson, 1992). Normal erythrocyte 5 million to 6 million cells / cc. The number of erythrocytes varies widely among individuals with one another. The number of erythrocytes and propagated in the event of a change in the time or are in a high area with the aim of normalizing the transport of O2 to the network. The number of erythrocytes is influenced by sex, age, body condition, daily variation, and the state of stress. A large number of erythrocytes is also due to the size of the blood cells themselves.
To calculate the number of erythrocytes using a Neubauer Hemocytometer that Suck blood with a pipette toma (color mixer in the bag. Puffy red) then proceed to suck up to the mark 101 Hayem solution (Siswanto, 2011). Erythrocytes is composed of 55-56% water, 30-36% hemoglobin and 5% organic matter. Hemoglobin is the substance in the form of oxygen-carrying pigment in erythrocytes and is a conjugated protein consisting of a protein called globin and non-protein heme pigment containing iron (Titik, 2012).
Leukocytes
Leukocytes or white blood cells are the body's defense system unit that moves. The function of defense against invading foreign substances (such as Baktri and viruses) is done in two ways: (1) to "swallow" and digest foreign bodies via phagocytosis, and (2) via the immune response (immune) as the production of antibodies. Defense Task leukocytes also serves as a "force cleaner" that removes dirt debris body with phagocytosing dead cells or damaged (Soewolo, 2000). Leukocytes in the blood are less numerous than erythrocytes at a ratio of 1: 700 (Frandson, 1992). Leukocytes are part of nucleated blood cells, also called white blood cells. In normal blood leukocyte counts were found on average 4000- 11,000 cells / cc. If there are more than 11 000 cells / mm 3, the condition is called leukocytosis, and when the number is less than 4000 cells / mm 3, it is called leukopenia. Fluctuations in the number of leukocytes in each individual is quite large in certain conditions such as stress, age, and other physiological activities. Leukocytes play an important role in the cellular and humoral defense of the organism against foreign objects. Leukocyte count more produced if the condition of the body is sick if the blood circulation leukositnya amount less than eritrositnya (Pearce, 1979). White blood cells play a role in fighting infection. The decline in the number of leukocytes can occur due to intestinal infections, poisoning bacteria, septicoemia, pregnancy, and parturition (Kimball, 1988). The number of leukocytes is affected by the condition of the body, stress, lack of food or caused by other factors. Leukocytes is an important component, which has a role in the immune system. Increased number of white blood cells is a response in the form of protection against the presence of foreign cells include bacterial infection that enters the body. The production will be directed toward leukocytes infected areas as defense. The rise in the number of leukocytes is an indicator of infection resulting in inflammation (Suhermanto, 2011). In a laboratory blood cells can be calculated by using a haemocytometer, which consists of a glass pipette and piece.  There are two kinds of pipette pipette namely red blood cells and white blood cell pipette (Tim lecturer, 2014).
The number of erythrocytes in animals and humans is influenced by several factors, among others, by sex, age and animal adaptation to oxygen environment. In general, males have erotrosit amount more than the females. For example, in humans the number of erythrocytes male about 5 million per mm 3 and erythrocyte adult female approximately 4.5 million per mm 3. The number was the lowest at the age erotrosit newborn to approximately 8-12 weeks of age, then the number of erythrocytes will continue to grow until the age of about 25 years. And will decrease again in old age. The average leukocyte count of 11,000 / mm 3. Leukocytes play a role in the body's defense system. In general, animals or humans to adapt to a low oxygen environment (eg living in upland areas) have a red cell count more than those adapted to high oxygen environment (eg lowland) (Tim lecturer, 2013). The average number of erythrocytes in mice under normal circumstances, ie 7x106-9,7x106 / mm3 (Wajizah, 2013).
Factors that affect the amount of erythrocytes is:
Red blood cells are building blocks of the blood cells whose numbers at most. In women, the numbers ± 4.5 million / mm 3 of blood, while the male ± 5 million / mm 3 of blood. However, that number could rise or down, depending on the person's condition.
The following factors - factors that affect the number of red blood cells:
1.     Sex. In normal men the amount (concentration) of erythrocytes reach 5.1 to 5.8 million per cubic milliliter of blood. In normal women from 4.3 to 5.2 million per cubic milliliter of blood.
2.     Age . Adults have a red cell count more than children.
3.     Place Altitude. People who live in the highlands tend to have more ertrosit number.
4.     Someone Body Condition. Pain and wound bled a lot to reduce the amount of blood ertrosit









 IV.          Research Methods
4.1  Tools and Materials
Tool
·        Microscope
·        Haemocytometer
·        The glass cover
·        Pipette
·        A set of surgical instruments
·        Pipette red blood cells
·        Pipette white blood cells
Material
·        Solution hayem
·        Solution turk
·        Distilled water
·        Experimental animals: animals poikilotermik (fish)
homoiotermik animal (Mus musculus)

4.2  Procedure













Rounded Rectangle: Animal inserted into the glass lid , ether or chloroform were prepared on cotton inserted into the lid








Rounded Rectangle: If you want to calculate the erythrocytes then suction out the blood that red blood pipette but if will then suction blood leukocyte count with white blood pipette








Rounded Rectangle: Shake the pipette was about 3 minutes , then dispose of a few drops of solution from pipette tip by gluing on blotting paper






Rounded Rectangle: Touch the tip of the pipette on room air hemocytometer with glass lid ( hemositoeter been prepared under the microscope )






Rounded Rectangle: Calculate totality swath of red blood cells in the red blood cell count and white blood cells






Rounded Rectangle: For the calculation of red blood cells in the large central box hemositometer while the white cell count dah perhitngannya on the outside edge of the box hemocytometer
 



















































    V.          Result of Observation

Group
Poikilotermik Animal
Homoiotermik Animal
Leucosit
Erytrosit
Leucosit
Erytrosit
1
2
3
4


1.600
9.400


690.000
710.000
12.000
9.450
850.000
1.560.000


Calculation formula of red blood cells (erythrocytes) and white blood cells (leukocytes)
·       Red blood cells (erythrocytes)
·       White blood cells (leukocytes)


 VI.          Pembahasan
            Di dalam laboratorium sel darah dapat dihitung dengan menggunakan alat yang disebut dengan haemocytometer, yang terdiri dari pipet dan keping kaca. Ada dua macam pipet, yaitu pipet sel darah merah (yang bertanda sel butiran darah merah) dan pipet sel darah putih (yang bertanda sel butiran darah putih). Pada praktikum ini, yaitu mengenai menghitung eritrosit dan leukosit hewan poikilotermik yang betujuan untuk menghitung eritrosit dan leukosit pada hewan yang tergolong poikilotermik. Hewan coba yang digunakan adalah mencit (Mus musculus) dan Ikan. Untuk kelompok 1 – 2 menggunakan mencit, dan kelompok 3 – 4 menggunakan ikan.
Pada praktikum ini, langkah pertama yang dilakukan adalah membuka pada bagian perut hingga dada sehingga tampak jantung dengan pembuluh darah besarnya. Selanjutnya yaitu menusuk salah satu pembuluh darah sampai darah keluar. Kemudian menghisap darah yang keluar dengan pipet darah sampai angka 0,5, lalu darah yang sudah dihisap akan dimasukkan ke dalam larutan hayem (untuk sel darah merah) dan kedalam larutan turk (untuk sel darah putih). Pada praktikum ini digunakan dua larutan yaitu larutan hayem yang digunakan sebagai larutan pengencer untuk menghitung eritrosit sedangkan pada leukosit larutan yang digunakan adalah larutan turk. Larutan Hayem terdiri dari Natrium Sulfat yang merupakan zat anti koagulan yang akan mencegah terjadinya  aglutinasi. Selain itu Natrium Sulfat 5 gr berfungsi untuk melisiskan leukosit dan trombosit, sehingga yang dapat diamati eritrosit saja. Larutan Natrium clorit 1 gr bersifat isotonis pada eritrosit (Syaifuddin,1997). Kandungan lain adalah formalin 40 % yang berfungsi untuk mengawetkan / mempertahankan bentuk discoid eritrosit. Kandungan larutan Hayem ini mengakibatkan larutan Hayem dikenal sebagai larutan Formasitrat. Fungsi dari larutan hayem antara lain adalah :
1.     Isotonis pada eritrosit
2.     Untuk pengencer eritrosit
3.     Merintangi pembekuan
4.     Memperjelas bentuk eritrosit
5.     Mempertahankan bentuk diskoid eritrosit dan tidak menyebabkan aglutinasi (Syaifuddin,1997)
Pada leukosit, digunakan larutan Turk, karena larutan ini terdiri atas asam asetat 2 % berfungsi untuk melisiskan trombosit dan eritrosit, sehingga hanya leukosit yang bisa diamati; dan gention violet 1 % yang memberikan warna ungu muda pada inti dan sitoplasma granula leukosit, sehingga jelas dibawah mikroskop dan memudahkan perhitungan. Untuk pengenceran leukosit, darah yang keluar dari luka dihisap hingga skala 0.5. Lalu dihisap larutan Turk hingga skala 11. Yang berarti dalam praktikum ini digunakan pengenceran 20 kali. Larutan turk ini berfungsi sebagai :
1.   Memberi warna putih pada inti dangranula eritrosit
2.   Memecah eritrosit dan granula tetapi tidak memecah leukosit (Syaifuddin,1997)
Menghisap larutan sampai larutan dalam pipet mencapai angka 100. Setelah itu mengocok selama 3 menit, kemudian membuang beberapa tetes larutan dari pipet dengan menempelkan pada kertas hisap. Untuk mengamati sel darah merah dan sel darah putih, menyentuhkan ujung pipet pada ruangan udara antara haemocytometer dengan gelas penutupnya. Kemudian mengamati dibawah mikroskop dan menghitung jumlah sel darah merah atau sel darah putih dengan masing - masing pada lima petak perhitungan pada haemocytometer.
Perhitungan jumlah sel darah merah (eritrosit) menggunakan rumus:
Perhitungan jumlah sel darah putih (leukosit) menggunakan rumus:
            Hasil perhitungan yang diperoleh dari kelompok 1 sampai kelompok 4 adalah sebagai berikut:
            Kelompok 1 dengan menggunakan hewan coba mencit diperoleh jumlah eritrosit sebesar 850.000/mm3 dan untuk jumlah leukosit sebesar 12.000/mm3. Kelompok 2 dengan menggunakan hewan coba mencit diperoleh jumlah eritrosit sebesar 1.560.000/mm3 dan untuk jumlah leukosit sebesar 9.450/mm3. Kelompok 3 dengan menggunakan hewan coba ikan diperoleh jumlah eritrosit sebesar 690.000/mm3 dan untuk jumlah leukosit sebesar 1.600/mm3. Kelompok 4 dengan menggunakan hewan coba ikan diperoleh jumlah eritrosit sebesar 710.000/mm3 dan untuk jumlah leukosit sebesar 9.400/mm3.
            Berdasarkan data yang diperoleh dari percobaan tersebut, dapat kita ketahui bahwa terdapat perbedaan jumlah eritrosit dan jumlah leukosit pada hewan poikilotermik tersebut meskipun dengan spesies yang sama. Hal tersebut dapat dikarenakan oleh berat dari masing – masing hewan, jemis kelamin, umur hewan tersebut. Jika kita bandingkan hasil yang diperoleh kelompok 1 dan 2 dapat dilihat jika jumlah eritrosit terbanyak yaitu pada kelompok 2 yaitu sebesar 1.560.000/mm3 sedangkan paling sedikit pada kelompok 1 yaitu sebesar 850.000/mm3. Sedangkan untuk jumlah leukosit, jumlah terbanyak pada kelompok  1 yaitu sebesar 12.000/mm3 dan jumlah terkecil yaitu pada kelompok 2 sebesar 9.450/mm3.
            Selanjutnya yaitu jumlah eritrosit yang diperoleh kelompok 3 dan 4. Jumlah eritrosit tertinggi pada kelompok 4 yaitu  sebesar 710.000/mm3 dan jumlah eritrosit terendah pada kelompok 3 yaitu sebesar 690.000/mm3. Sedangkan untuk jumlah leukosit, jumlah terbesar adalah pada kelompok 4 yaitu sebesar 9.400/mm3 dan untuk jumlah leukosit terndah yaitu pada kelompok 3 sebesar 1.600/mm3.
Dari hasil perhitungan dari percobaan tersebut terdapat perbedaan jumlah eritrosit dan leukosit pada hewan yang tergolong poikilotermik dan homoiotermik. Berdasarkan teori, jumlah eritrosit normal pada hewan poikilotermik (pada ikan) yaitu berkisar antara 290.000 - 2.100.000/mm3, sedangkan jumlah leukositnya yaitu berkisar anatara 109.350 - 726.100/mm3. Untuk hewan homoiotermik (mencit), jumlah eritrositnya berkisar antara 7,2 - 9,6 juta/mm3 dan jumlah leukositnya antara 4000 - 10.000/mm3. Pada percobaan yang kami lakukan terdapat perbedaan antara jumlah eritrosit dan jumlah leukosit dari hewan yang di cobakan. Hal tersebut dapat dibuktikan hasil yang diperoleh dari kelompok 1 dan 2 dengan menggunakan hewan coba yang sama yaitu mencit, diperoleh hasil yang berbeda. Begitu juga hasil yang diperoleh pada kelompok 3 dan 4 bahwa hasil yang diperoleh juga berbeda meskipun hewan coba yang digunakan sama. Hal tersebut karena dipengaruhi oleh beberapa faktor, antara lain; umur, jenis kelamin, aktivitas tubuh, adaptasi dengan lingkungan. Jika dilihat berdasarkan umur, maka umur tiap hewan coba berbeda sehingga jumlah eritrosit dalam darahnya juga berbeda. Karena semakin tua atau semakin muda umur hewan tersebut, maka jumlah eritrosit dalam darahnya juga rendah. Jenis kelamin pada hewan yang digunakan juga mempengaruhi jumlah eritrosit dalam darahnya, karena hewan dengan jenis kelamin jantan lebih banyak eritrositnya dari pada hewan dengan jenis kelamin betina.
Jumlah kapasitas oksigen pada hewan poikilotermik dan hewan homoiotermik berbeda, jika dilihat berdasarkan lingkungannya. Hewan poikilotermik suhu tubuhnya cenderung mengikuti suhu lingkungan, sehingga jika pada dataran tinggi eritrositnya tinggi karena jumlah oksigennya sedikit, sebaliknya jika pada dataran rendah, maka jumlah eritrositnya sedikit karena jumlah oksigennya banyak. Sedangkan hewan homoiotermik, suhu tubuhnya tidak mengikuti suhu lingkungan sehingga perubahan jumlah eritrositnya cenderung stabil. Selain itu, jumlah kapasitas oksigen juga dipengaruhi oleh jumlah eritrosit dalam darah. Semakin banyak jumlah eritrosit dalam darah, maka semakin tinggi konsumsi oksigennya karena pada eritrositnya banyak mengandung hemoglobin yang berfungsi untuk mengikat O2, sedangkan jika jumlah eritrosit dalam darah itu sedikit, maka kapasitas konsumsi oksigennya juga rendah karena jumlah hemoglobin dalam darahnya juga rendah.
Jika dibandingkan dengan kadar eritrosit yang normal dengan kadar eritrosit yang diperoleh dari percobaan tersebut, maka jumlah eritrosit dan leukosit yang diperoleh dari kedua hewan uji tersebut tidak sesuai dengan teori, karena pada kelompok 1 dan 2, dengan hewan coba kewan homoiotermik (mencit) jumlah eritrosit dan leukosit yang diperoleh sangat jauh dari kadar eritrosit normalnya. Untuk hewan poikilotermik (ikan) jumlah eritrosit dan leukosit yang diperoleh kelompok 3 dan 4 sudah sesuai dengan teori, karena hasil yang diperoleh berada ditengah-tengah dari rentangan ikan normal.
Jumlah sel eritrosit dan leukosit  berbeda – beda, hal ini dapat disebabkan oleh beberapa faktor yaitu:
1.     Nutrisi
bila seseorang mendapatkan nutrisi banyak maka orang tersebut akan memiliki sel darah yang banyak dibandingkan dengan orang yang kekurangan nutrisi.
2.     Usia / umur
jumlah eritrosit pada bayi yang baru lahir yaitu 6,83 juta/ml. Ketika bayi tersebut tumbuh eritrositnya berkurag menjadi sampai 4 juta/ml, kemudian naik lagi pada orang dewasa sehat sekitar 4,5 juta/ml.
3.     Faktor lingkungan
di daerah dataran tinggi orang akan lebih banyak memiliki sel darah. Hal ini dikarenakan di dataran tinggi seseorang membutuhkan oksigen lebih banyak sehingga tubuh akan meningkatkan produksi eritrosit lebih banyak agar hemoglobin dapat lebih banyak mengikat oksigen. Hemoglobin merupakan protein yang mengandung senyawa hemin yang mengandung besi yang memilki daya ikat terhadap oksigen dan karbondioksida.
4.     Aktivitas
orang yang memiliki banyak aktivitas akan membutuhkan nutrisi yang banyak sehingga jumlah sel darahnya juga akan banyak.
5.     Jenis kelamin
perempuan memiliki jumlah sel darah (eritrosit) lebih sedikit daripada laki – laki. Hal ini disebabkan berkurangnya eritrosit pada perempuan ketika menstruasi.
Kesalahan yang terjadi pada saat melakukan perhitungan dalam melakukan percobaan tersebut dapat disebabkan oleh beberapa hal yaitu seperti kesalahan teknis yang dilakukan oleh praktikan, ataupun peralatan. Kesalahan teknis yaitu adanya gelembung pada saat mengambil darah atau larutan pengencer sehingga bisa mempengaruhi volume pengenceran, penyedotan yang terlalu kuat sehingga volume darah yang diambil tidak sesuai dengan skala yang ditentukan. Pada saat melakukan pengocokan, kurang homogen sehingga menyebabkan sel darah menjadi sulit diamati karena sel darah saling bertumpuk atau tidak ada karena mungkin yang masuk pada haemacytometer adalah larutan pengencernya saja. Kesalahan peralatan bisa dikarenakan mikroskop yang digunakan memiliki fokus kurang tepat sehingga sel darah sulit diamati, selain itu pipet sel darah yang digunakan pada ujungnya terdapat sisa darah ataupun terdapat cairan didalamnya sehingga sulit digunakan dalam penyedotan darah dan larutan pengencernya.


VII.          Closing
7.1  Conclusion
    • Erythrocyte levels in animals poikilothermic obtained ranged between normal erythrocyte levels in animals poikilotermik between 290000-2100000 / mm3. Leukocyte levels were obtained range between 109350-726100 /mm 3.
    • Erythrocyte levels in animals homoiotermik obtained between 7.2 to 9.6 million / mm 3. Leukocyte levels were obtained range between 4000-10000 / mm 3.
7.2  Suggestion
At the time of the experiment, the tool should be used in the first check, if there is residual water or blood in the blood pipette, then it should be cleaned so as not to clog up the works. Moreover, in doing the work should be carefully and thoroughly in order to not get an error during the experiment, especially at the time of calculation under the microscope on a haemocytometer related to the number of erythrocytes and leukocytes.



REFFERENCE

Frandson, R. D. 1992. Anatomi dan Fisiologi ternak. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press.
Kimball, J.W.  1988.  Biologi Jilid II.  Jakarta: Erlangga. 
Pearce, Evelyn C. 1979. Anatomy & Physiology for Nurses. Terjemahan oleh Sri Yuliani Handoy. Jakarta : PT.Gramedia Pustaka Utama.
Siswanto. 2011. Gambaran Sel Darah Merah Sapi Bali (Studi Rumah Potong). Buletin Veteriner Udayana. Laboratorium Fisiologi Veteriner Fakultas Kedokteran Hewan, Univ. Udayana Denpasar, Bali. ISSN : 2085-2495 Vol. 3 No.2. :99-105
Soewolo. 2000. Pengantar Fisiologi Hewan. Jakarta: Departemen Pendidikan Nasional.
Suhermanto, Akhmad. 2011. Pemberian Total Fenol Teripang Pasir (Holothuria scabra) untuk Meningkatkan Leukosit dan Diferensial Leukosit Ikan Mas (Cyprinus Carpio) yang Diinfeksi Bakteri Aeromonas hydrophila. Jurnal Kelautan. Faculty of Fisheries and Marine      University of Brawijaya Science. ISSN : 1907-993149. Volume 4, No.2
Syaifuddin. 1997. Anatomi Fisiologi untuk siswa Perawat. Buku Kedokteran Jakarta: EGC.
Tim dosen. 2014. Petunjuk Praktikum Fisiologi Hewan. Jember: Jember University Press.
Titik, Mulyani, et all. 2012. Pengaruh Penangkaran Terhadap Profil Eritrosit Lumba-Lumba Hidung Botol Dari Perairan Laut Jawa. Jurnal Sain Veteriner. Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Gadjah Mada. ISSN : 0126 – 0421 JSV 30 (1)
Wajizah, Siti. 2013. Hewan Profil Lemak Plasma dan Nilai Hematologi Tikus Sprague dawley dengan Suplementasi Amida Minyak Ikan. Jurnal Kedokteran. Banda Aceh: Universitas Syiah Kuala. ISSN : 1978-225X.

Tidak ada komentar:

Posting Komentar